师：同学们，今天复习实验的第二课时——实验器材和过程的操作。本节课聚焦三个题目中高频出现的实验器材，侧重复习它们在操作层面的相关知识，分别是显微镜、血球计数板和高压蒸汽灭菌锅。显微镜是我们很熟悉的仪器了，这里有一份有关显微镜结构的错误笔记，请大家找找错误在哪里。光窗错了，这个应该是通光孔，通光孔的大小是固定的，不能调节。那光窗在哪里呢？光窗在遮光器上。我们换个角度看一下遮光器，在遮光器上有大小不同的孔，这些就是光圈使用的光窗，正好对准通光孔，我们可以使用不同大小的光窗来控制进入镜筒的光线多少，所以光窗是可以用来调节视野亮度的。

　　这里另外一个错误出现了，遮光器应该是调节视野的亮度，而不是大小。通过对常犯错误的纠正，希望同学们能正确识别光窗、通光孔、遮光器这三个结构，并且学会使用遮光器和反光镜来调节视野亮度。接下来结合具体情境进行相关操作演练。左图是光学显微镜下观察某池塘水中微生物的照片，请同学们判断中间亮的黑边缘圆圈最可能是什么？符合该特征的应该是气泡，有可能是在制片过程中产生的。怎样移动玻片，使气泡旁的微生物移到视野中央呢？这考察显微镜成像的特点，我们知道在显微镜下，物像是上下左右均颠倒的像，因此物像移动的方向和玻片移动的方向应该相反。在视野中物像要移到视野中央，应该向右移动，那么玻片的移动方向就应该是向左。

　　如果选用放大10倍的目镜和放大10倍的物镜，观察到的微生物面积被放大了多少倍呢？放大倍数等于物镜和目镜放大倍数的乘积，在这种情况下，放大倍数为100倍。但放大倍数指的是物体的长度或宽度的放大倍数，那么观察的微生物面积实际上被放大了1万倍。

　　使用高倍镜观察玻片标本与低倍镜有什么不同呢？在高倍镜下观察，我们发现细胞的体积变大了，但是数目变少了，视野变暗了，物像也变模糊了。在这种情况下，我们应该如何调节显微镜呢？应该先调节显微镜视野的亮度，然后再调节显微镜的焦距，使物像清晰。所以正确的操作顺序应该是：将观察的物像移至视野中央，转动转换器换用高倍物镜，通过使用光窗或者反光镜调节视野的亮度，然后再使用细准焦螺旋调焦，直至物像清晰。在实验操作过程中，不可避免会出现一些异常情况，下面我们就来分析实验过程中出现的一些现象。

　　观察装片时，如果发现视野左侧较暗，右侧较亮，该如何解决呢？视野中一侧较暗，一侧较亮，说明应该是视野中光线分布不均匀的问题，有可能是反光镜调节光线的角度不对。我们可以尝试调节反光镜的角度，使视野内光线分布均匀。某同学在显微镜下观察某植物材料的切片，当转动细准焦螺旋时，有一部分细胞看得很清楚，有一部分细胞则较模糊，这是什么原因造成的？其实这考察显微镜工作的原理，显微镜成像在一个焦平面上，如果切片厚薄不均，在焦平面上的细胞看得清楚，不在焦平面上的细胞就比较模糊。在这种情况下，我们只能重新制片，尽可能选择单层细胞的切片。在光照明亮的实验室里观察某植物细胞时，能清晰地观察到细胞的轮廓，但是看不清内部结构，怎样操作能看清楚细胞的内部结构呢？能清晰地观察到细胞的轮廓，但是看不清内部结构，说明通光量太大，视野亮度过大。我们可以通过改用平面反光镜或者缩小光窗来调节视野的亮度，使视野亮度降低。介于第二、第三两题对装片和视野亮度的思考，在使用显微镜计数酵母菌时，你又会提出怎样的建议呢？

　　一定要等到酵母菌全部沉降到计数室底部再进行计数。因为在对酵母菌进行计数时，我们需要同时观察到方格线和酵母菌，调焦后我们只能观察到该平面的酵母菌，如果酵母菌分布在不同的层面，在计数时就会导致酵母菌的漏数，从而增加实验的误差。由于活的酵母菌折光率跟水接近，因此在显微镜下不易观察，我们可以将显微镜的视野适当调暗一些。

　　说到血球计数板，接下来复习血球计数板的使用方法。由于平时使用较少，同学们总感觉有些陌生，我们首先复习血球计数板的结构。在血球计数板上有四条凹槽构成三个平台，中间的平台较宽，又被一横的凹槽分割成两半，每半边都有一张方格网。我们将方格网放大，可以看到方格网上有9个方格，那么哪个方格才是计数酵母菌的区域呢？其实只有正中间的5号方格才是。这个方格的边长是1毫米，戴上盖玻片加样后，我们可以在侧面看到该液面的高度，该液面的高度其实就是计数室的高度，为0.1毫米，因此计数室的体积就是0.1立方毫米。

　　在这个计数室内又由400个小格组成，我们将5号方格进一步放大，可以看到这个方格原来是先被双实线划分出了25个格子，然后在每个格子里又划分出了16个小格，这样正好就组成了400个格子。为了方便讲解，我们习惯于用大格、中格和小格来描述这里不同大小的格子，同学们，该怎么对应起来呢？

　　大格其实指的就是5号方格，也就是计数室区域，我们用红色的框表示。中格，在显微镜下我们可以借助双实线来进行判断，我们用绿色的框来表示。在中格里出现的最小的格子就是小格，我们用黄色的框来表示。从数量上说，一个计数室就应该由25个中格组成，由400个小格组成。复习完血球计数板的结构，接下来结合具体情境进行计数的相关操作演练。采用血球计数板计数观察到的计数室酵母菌分布如下图，则培养液中酵母菌的密度是多少个每毫升呢？